Ontwikkeling van een FA-test voor het opsporen van nagalase in humaanserum

Abstract

Epsilon Biotech in Zonhoven ontwikkelt methodes om nagalaseactiviteit in humaanserum te bepalen. Verschillende pathologieën zijn gerelateerd aan nagalase. Er zijn artikels die nagalase linken aan alcoholmisbruik en prostaatkanker. Hoofddoel is dus een efficiënte meetmethode te ontwikkelen voor nagalase, zo kostefficiënt mogelijk met korte analyseduur, waarna patiëntensera op nagalaseactiviteit getest worden.

Twee methoden werden getest om de nagalaseactiviteit te bepalen. De eerste is een enzyme-linked fluoroimmunoassay (ELFIA), waarbij nagalase uit serum gevangen wordt met antilichamen, specifiek tegen het nagalase. Na wassen en toevoegen van fluorescerend substraat wordt via fluorescentie de nagalaseactiviteit gemeten. Omdat deze methode niet de gewenste resultaten opleverde wordt er overgestapt op een fluorimetric assay (FA). Hierbij worden serum en fluorescent substraat rechtstreeks samengevoegd en het fluorescentie signaal na 2 uur gemeten.

De FA-methode bepaalt de nagalaseactiviteit in serum reproduceerbaar, met beperkte analyseduur en lage kost. De nagalaseactiviteitsbepaling via FA kan worden toegepast om pathologieën zoals overmatig alcoholgebruik en kankers op te volgen. In tegenstelling tot literatuurgegevens blijkt nagalase ongeschikt voor prostaatkankermonitoring. Voor alcoholmisbruik en het opvolgen van andere kankers via de tumormerkers zoals CA 1.99 (pancreas), CA 1.53 (borst) en CA 1.25 (ovarium) is er statistisch een significant verband tussen de nagalaseactiviteit en de ernst van de aandoening.