Kankerscreening op basis van nagalase & nagalase-DBP-complex

Abstract

Epsilon Biotech doet onderzoek naar nagalase en naar het vitamine-D-bindend proteïne (DBP), een precursor van de DBP-macrofaagactiverende factor (DBP-MAF). Nagalase wordt tot overexpressie gebracht in tumorcellen van kankerpatiënten die in stadium III of hoger zitten. Dit enzym inactiveert DBP of kan een inactief complex vormen met DBP-MAF, wat in beide gevallen leidt tot immunosuppressie. Het doel van dit onderzoek is een algemene kankermerker zoeken op basis van de complex- of nagalaseactiviteit in het bloed. Het complex wordt aangetoond met een sandwich ELISA. Door het toevoegen van ammoniumsulfaat dissocieert het complex in nagalase en DBP-MAF. De activiteit van nagalase vóór en na dissociatie wordt bepaald met een fluorescence assay en geeft respectievelijk de vrije en totale nagalase activiteit. Het verschil tussen deze nagalaseactiviteiten kan een maat zijn voor de complexvorming, die hoger wordt verwacht bij kankerpatiënten. Er wordt onderzocht of op basis van deze complex- en nagalaseactiviteitsmetingen een onderscheid gemaakt kan worden tussen gezonde en kankerpatiënten. Uit de resultaten volgt dat de hoeveelheid van het complex bij de meeste kankerpatiënten echter lager is dan bij gezonde individuen. De totale nagalaseactiviteit daarentegen is hoger bij kankerpatiënten. Nagalase vormt dus niet enkel met DBP-MAF een complex maar ook met andere macromoleculen afkomstig van kankercellen. Het verschil in nagalase is hoger voor vier van de vijf gemeten kankers en kan een toekomstige kankermerker zijn.